綿羊鞭蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒技術(shù)的*性：

（一）靈敏度高

雖然酶活性調(diào)節(jié)ELISA方法的靈敏度目前并不十分理想，但在酶活性放大ELISA中，檢測的靈敏度遠比RIA高。根據(jù)質(zhì)量作用定律。即免疫反應所形成的免疫復合物量與反應物濃度成正比。推測所檢測的待測物分子數(shù)為1。已知1個摩爾濃度含6.02×1023個分子，那么理論推測酶活性放大Elisa方法的zui低檢測限可達1.7×10-24mol/L。雖然在實際應用中由于反應條件和試劑純度以及儀器精度等因素的影響，往往達不到這個水平（大于104個分子），但表明Elisa在靈敏度方面的改進潛力是很大的。

（二）特異性強

從免疫反應的角度來說，Elisa與RIA的特異性應該是。但在ELISA方法中，由于作用檢測指示劑的酶與其底物的反應有專一性，從而增加了該方法的特異性。

（三）對儀器設備要求不高，測定成本低

Elisa測定在普通實驗室便可進行，常用的儀器設備包括加樣器、培養(yǎng)箱、酶標專用讀數(shù)器等。按現(xiàn)有價格折算，酶標儀的價格只及液閃儀的1/6至1/4，因此每測定一個樣本所需成本不及PIA的1/10至1/16。某些定性Elisa方法，還可在野外進行，操作十分方便。

（四）方法快速、簡便

均質(zhì)酶免疫測定方法操作時，所有反應試劑均在同一體系內(nèi)進行，不需任何分離步驟，操作十分簡便、快速，數(shù)分鐘便能得出結(jié)果。某些定性Elisa試劑盒，如國外的某些奶牛發(fā)情鑒定和妊娠診斷Elisa試劑盒，數(shù)分鐘時間便能完成一次測定。

（五）試劑保存時間較長

作為檢測指示劑用的酶和酶標記物，在低溫或干燥條件下相對穩(wěn)定，可保存半年至數(shù)年之久。

（六）自動化程度高

Elisa由于不存在放射性同位素污染，因此，除加待測樣本需要人工操作外，其他各步驟均可用儀器自動化完成。在這種自動化條件下，平均每人每天可完成2000余個樣本的檢測工作。

（七）方法種類多

ELISA技術(shù)可以充分利用單克隆抗體的優(yōu)點，并能利用某些非免疫反應試劑（如SPA、凝集素等）的作用，發(fā)展成為許多新方法。此外，發(fā)展Elisa技術(shù)還可以從酶及其底物兩方面著手。這是因為：*，用于ELISA技術(shù)的酶其種類遠遠多于可用作RIA檢測指示劑的放射性同位素。生物界的酶多種多樣，有希望開發(fā)很多類型的酶用于Elisa，并建立相應的ELISA方法。相反，自然界的化學元素是有限的，放射性同位素的種類更加有限。*，由于酶的多樣性，酶作用底物也有多種多樣，與此相對應的生色源或供氫體的種類也有遠大的開發(fā)和發(fā)展?jié)摿Α?/p>

PCR技術(shù)的定量原理：

擴增曲線

在Real- qPCR中，對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應的進行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。

在Real-time qPCR擴增早期，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時即為基線期。

PCR反應過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應不再以指數(shù)形式生成模板，從而進入“平臺期"。在該時期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。