臨床上多種病原生物如病毒、立克次體、衣原體、胞內寄生的細菌、原蟲等的分離培養基和藥物敏感試驗是通過細胞培養技術完成的,如人免疫缺陷病毒(HIV)和新近出現的嚴重急性呼吸綜合征(SARS)病毒等就是通過細胞培養發現的。臨床應用微量全血培養技術診斷HIV的感染,已用于兒童HIV垂直感染的早期診斷及可疑感染者的確認。
.病毒的分離的常用細胞
對病毒性疾病的病原學診斷,zui可靠的方法是從標本中分離并鑒定出致病性病毒。由于病毒具有嚴格的細胞內寄生性,對病毒的分離培養必須選用敏感的細胞培養基,包括動物、雞胚和細胞培養。目前zui被廣泛采用的方法就是細胞培養技術。用于病毒分離的細胞種類很多,由于不同種類病毒對細胞的敏感性不同,因此首先應根據病毒的種類選擇敏感細胞進行分離培養。細胞的種類按其來源、染色體特征及傳代次數等可分為原代細胞、二倍體細胞及傳代細胞3種類型。但由于原代細胞只能傳~3代,器官來源、操作繁鎖等問題使該方法應用受限,而二倍體細胞和傳代細胞,由于可以傳代、培養方便,故較為常用。
2.體外抗病毒要效試驗
抗病毒要效測定試驗分為體內試驗和體外試驗。體外試驗是采用組織細胞培養基來觀察藥物的抗病毒作用。在實驗中要根據藥物的特性來選擇病毒;根據病毒對細胞易感性選擇所用細胞;觀察藥效指標常采用病毒致細胞病變(CPE)情況來判定藥物的抗病毒效果。下面以抗呼吸道病毒要物為例采用微量細胞培養法介紹藥物體外抑病毒試驗方法。
0vail
25克 Cholic acid 牛膽酸 BR,98%
00克
500克
0克 Hyodeoxycholic acid 培養基 BR,98%
25克
00克
0克 Deoxycholic acid 去氧膽酸 BR,99%,有害品
00克
500克
0克 Dehydrocholic acid 脫氫膽酸 BR,98.5%
50克
500克
25克 Sodium dehydrocholate 脫氫膽酸鈉 BR,98%
5克 UDCS 烏索去氧膽酸 BR,98%
25克
5克 CDCA 培養基脫氧鵝膽酸 BR,98%
25克
00克
250克 Egg yolk powder 蛋黃粉 BR
500克 Agar 寒天 BR,強度200g/c㎡
25公斤