小鼠ELISA試劑盒用純化的小鼠NLRP3抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入小鼠NLRP3，再與HRP標(biāo)記的NLRP3抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的NLRP3呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中小鼠NLRP3濃度。
小鼠ELISA試劑盒操作步驟：
1.細(xì)胞上清：
處理前有必要是細(xì)胞離心去除,每孔直接加100μl即可.假如濃度太高需稀釋時(shí),用規(guī)范品稀釋液直接稀釋.
?2.腦脊液：
處理前有必要是細(xì)胞離心去除,每孔直接加100μl即可.假如濃度太高需稀釋時(shí),用規(guī)范品稀釋液直稀釋.
3.血清血漿：
請(qǐng)參加50ul樣本剖析緩沖液后加50ul標(biāo)本,如稀釋量大,請(qǐng)將樣本與樣本剖析緩沖液等量參加,缺乏部分用規(guī)范品稀釋液補(bǔ)充至100ul.
A.血清標(biāo)本應(yīng)是自然凝結(jié)后,取上清,防止在冰箱中凝結(jié)血液；
B.血漿標(biāo)本,引薦用EDTA的方法搜集若待測(cè)樣本不能及時(shí)檢測(cè),標(biāo)本搜集后請(qǐng)分裝,凍存于－20℃,防止反復(fù)凍融.
C.血清標(biāo)本不應(yīng)添加任何防腐劑或抗凝劑；
D.標(biāo)本應(yīng)清澈通明,檢測(cè)前樣本中如有懸浮物應(yīng)經(jīng)過(guò)離心去除.
E.請(qǐng)勿運(yùn)用溶血,高血脂或污染的標(biāo)本檢測(cè),不然成果將不準(zhǔn)確.
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