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小鼠椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞

【概要描述】小鼠椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:U2932人B細(xì)胞U937-LUC-PURO人組織細(xì)胞B958絨猴EB病毒轉(zhuǎn)化的白細(xì)胞AU565乳腺癌BT-20乳腺癌BT-20/nKR乳腺癌BT-474乳腺癌BT-483乳腺癌BT-549乳腺癌CCD-1065Sk乳腺癌

型號: 點擊量:542 廠商性質(zhì):代理商 更新日期:2025-03-21
產(chǎn)品詳情

小鼠椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞

產(chǎn)品名稱

小鼠椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞

組織來源

椎間盤組織

規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

包裝

T25培養(yǎng)瓶

貨號

GOY-01X1288

細(xì)胞形態(tài)

梭形、多角形


小鼠椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞

小鼠椎間盤纖維環(huán)分離自椎間盤組織;椎間盤是位于脊柱兩椎體之間,由軟骨板、纖維環(huán)、髓核組成的一個密封體。上下有軟骨板,是透明軟骨復(fù)蓋于椎體上,下面骺環(huán)中間的骨面。上下的軟骨板與纖維環(huán)一起將髓核密封起來。纖維環(huán)由膠原纖維束的纖維軟骨構(gòu)成,位于髓核的四周。纖維環(huán)的纖維束相互斜行交叉重疊,使纖維環(huán)成為堅實的組織,能承受較大的彎曲和扭轉(zhuǎn)負(fù)荷。纖維環(huán)的前側(cè)及兩側(cè)較厚,而后側(cè)較薄。纖維環(huán)的前部有強(qiáng)大的前縱韌帶,后側(cè)的后縱韌帶較窄、較薄。纖維環(huán)細(xì)胞密度為9000個細(xì)胞/mm3,其外層的細(xì)胞呈梭型,主要屬于纖維細(xì)胞,內(nèi)層細(xì)胞呈圓形,主要屬于軟骨細(xì)胞。在培養(yǎng)的情況下,用透射電鏡觀察則有許多共同的超微結(jié)構(gòu)表現(xiàn),它們的核較圓,核仁較明顯。細(xì)胞質(zhì)內(nèi)可見大量的附有核糖體顆粒的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。細(xì)胞質(zhì)內(nèi)線粒體多,為橢圓形,有的可看到雙層單位膜,由單位膜包繞初級深酶體和次級深酶體。細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有一系列的扁平囊及小泡主成的高爾基復(fù)合體和分泌顆粒,纖維環(huán)細(xì)胞合成分泌蛋白多糖及膠原纖維的能力很旺盛,保證纖維環(huán)生理代謝活動所需的構(gòu)造物質(zhì)的供給。一但這種供給減少,纖維環(huán)的生物性能就會減弱,椎間盤開始退變。
方法簡介:

公司實驗室分離的小鼠椎間盤纖維環(huán)采用膠原酶-中性dan白酶聯(lián)合消化法并結(jié)合軟骨細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:

公司實驗室分離的小鼠椎間盤纖維環(huán)經(jīng)Ⅰ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

 


小鼠椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞

本公司所有產(chǎn)品僅供科學(xué)實驗,不做其他科學(xué)實驗外的使用!
小鼠椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞

培養(yǎng)基 FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 可傳3-5代左右

消化液 0.25%yi蛋白酶

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

小鼠椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞

準(zhǔn)備工作

1. 實驗器材準(zhǔn)備:準(zhǔn)備無菌的培養(yǎng)皿、培養(yǎng)瓶、移液管、離心管、手術(shù)器械等,并進(jìn)行高壓滅菌或其他合適的消毒處理。

2. 試劑準(zhǔn)備:配制或購買合適的培養(yǎng)基、消化酶(如、膠原酶等)、胎牛血清、雙抗等試劑,確保其無菌且在有效期內(nèi)。

3. 實驗動物或組織來源準(zhǔn)備:根據(jù)實驗需求,選擇合適的動物并進(jìn)行相應(yīng)的麻醉或處死,獲取所需組織;或從已有的組織樣本庫中獲取組織。

取材與處理

1. 取材:在無菌條件下,迅速取出目標(biāo)組織,盡量減少對組織的損傷,并去除多余的脂肪、結(jié)締組織等非目的組織。

2. 清洗:將取出的組織用預(yù)冷的無菌PBS沖洗數(shù)次,以去除血液和雜質(zhì)。

3. 剪切:將組織剪成約1 - 2mm3的小塊,以便后續(xù)消化。

細(xì)胞分離

1. 消化:將剪碎的組織塊放入含有適量消化酶的離心管中,在37℃恒溫?fù)u床或培養(yǎng)箱中消化一段時間。期間可輕輕搖晃離心管,使消化更均勻。

2. 終止消化:當(dāng)組織塊大部分被消化成單細(xì)胞懸液或小細(xì)胞團(tuán)時,加入含血清的培養(yǎng)基終止消化。

3. 過濾與離心:用細(xì)胞篩過濾細(xì)胞懸液,去除未消化的組織碎片,然后將濾液以適當(dāng)?shù)霓D(zhuǎn)速離心,收集細(xì)胞沉淀。

細(xì)胞觀察與檢測

1. 日常觀察:每天用倒置顯微鏡觀察細(xì)胞的形態(tài)、生長狀態(tài)、密度等,記錄細(xì)胞的變化情況,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞污染或異常,及時采取相應(yīng)措施。
2. 細(xì)胞計數(shù)與活力檢測:在需要時,可采用臺盼藍(lán)染色等方法對細(xì)胞進(jìn)行計數(shù)和活力檢測,以了解細(xì)胞的生長情況和健康狀態(tài)。

小鼠椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞

小鼠椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞

一、取材與分離

1. 快速操作

- 組織取材后需立即處理,避免長時間暴露于室溫或非營養(yǎng)環(huán)境。

- 使用無菌 PBS 或生理鹽水沖洗組織,去除血液、雜質(zhì)。

2. 消化酶選擇

- 根據(jù)組織類型選擇消化酶,避免過度消化導(dǎo)致細(xì)胞損傷。

- 消化時間需嚴(yán)格控制(通常 10-30 分鐘),可通過顯微鏡觀察細(xì)胞解離狀態(tài)。

二、培養(yǎng)條件優(yōu)化

1. 培養(yǎng)基選擇

- 使用含血清或特定生長因子的培養(yǎng)基(如 DMEM、RPMI 1640 等),部分細(xì)胞需添加胰島素、EGF 等。

- 避免頻繁更換培養(yǎng)基品牌或批次,減少細(xì)胞適應(yīng)壓力。

2. 貼壁與傳代

- 原代細(xì)胞貼壁能力較弱,可能需要包被培養(yǎng)皿(如膠原蛋白、多聚賴氨酸)。

- 傳代時密度建議控制在 70%-80%,過度匯合會導(dǎo)致接觸抑制和分化。

三、污染控制

1. 無菌操作

- 全程在超凈臺操作,使用一次性耗材,避免交叉污染。

- 培養(yǎng)基中可添加雙抗,但長期使用可能影響細(xì)胞活性。

2. 支原體檢測

- 定期檢測支原體污染(如 PCR 法),污染后需及時丟棄細(xì)胞。

四、狀態(tài)監(jiān)控

1. 日常觀察

- 每天檢查細(xì)胞形態(tài)、密度及培養(yǎng)基顏色,及時更換培養(yǎng)基(通常每 2-3 天換液一次)。

- 異常形態(tài)(如細(xì)胞變圓、碎片增多)可能提示污染或營養(yǎng)不足。

2. 傳代與凍存

- 原代細(xì)胞分裂次數(shù)有限(一般 5-10 代),需及時凍存早期代次細(xì)胞。

- 凍存液建議使用 DMSO+血清(或?qū)S脙龃媾囵B(yǎng)基),梯度降溫后液氮保存。

小鼠椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞

大鼠心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞

大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞

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八角茴香

大鼠成纖維細(xì)胞

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紫蘇油

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小茴香油

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人類星形膠質(zhì)瘤耐替莫細(xì)胞

石吊蘭

大鼠牙髓干細(xì)胞

莪術(shù)

大鼠牙齦成纖維細(xì)胞

生姜油

大鼠牙齦上皮細(xì)胞

荊芥油

大鼠牙周膜成纖維細(xì)胞

毛蕊花糖苷(麥角甾苷)

大鼠牙周膜干細(xì)胞

小鼠椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞雪膽甲

大鼠眼外肌成纖維細(xì)胞

阿拉伯糖

一次性針頭濾器 0.45um PALL

大豆苷元 供鑒別用




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