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大鼠支氣管成纖維細(xì)胞

【概要描述】大鼠支氣管成纖維細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:COR-L23非小細(xì)胞肺癌大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞大鼠牙周膜成纖維細(xì)胞大鼠牙周膜干細(xì)胞大鼠牙髓干細(xì)胞大鼠口腔黏膜上皮細(xì)胞大鼠舌表皮細(xì)胞大鼠鼓膜上皮干細(xì)胞大鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞大鼠鞏膜上皮細(xì)胞

型號: 點(diǎn)擊量:1121 廠商性質(zhì):代理商 更新日期:2025-03-19
產(chǎn)品詳情

大鼠支氣管成纖維細(xì)胞

產(chǎn)品名稱

大鼠支氣管成纖維細(xì)胞

組織來源

支氣管組織

規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

包裝

T25培養(yǎng)瓶

貨號

GOY-01X0717

細(xì)胞形態(tài)

成纖維細(xì)胞樣


大鼠支氣管成纖維細(xì)胞

大鼠支氣管成纖維分離自支氣管組織;支氣管(Bronchi),是指由氣管分出的各級分枝,由氣管分出的一級支氣管,即左、右主支氣管。左主支氣管與右主支氣管相比較,前者較細(xì)長,走向傾斜;后者較粗短,走向較前者略直,所以經(jīng)氣管墮入的異物多進(jìn)入右主支氣管。支氣管和氣管還有以區(qū)別就是,氣管是以“C"型的氣管軟骨為支架,而支氣管不是。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的支氣管成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁wan全,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。支氣管成纖維細(xì)胞在生理?xiàng)l件下的主要功能包括:構(gòu)造和維持組織的正常形態(tài),合成和釋放細(xì)胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時大量聚集修復(fù)損傷組織。
方法簡介:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠支氣管成纖維采用膠原酶-聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠支氣管成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

 


大鼠支氣管成纖維細(xì)胞

本公司所有產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn),不做其他科學(xué)實(shí)驗(yàn)外的使用!
大鼠支氣管成纖維細(xì)胞

培養(yǎng)基 FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)

消化液 0.25%yi蛋白酶

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

大鼠支氣管成纖維細(xì)胞

準(zhǔn)備工作

1. 實(shí)驗(yàn)器材準(zhǔn)備:準(zhǔn)備無菌的培養(yǎng)皿、培養(yǎng)瓶、移液管、離心管、手術(shù)器械等,并進(jìn)行高壓滅菌或其他合適的消毒處理。

2. 試劑準(zhǔn)備:配制或購買合適的培養(yǎng)基、消化酶(如、膠原酶等)、胎牛血清、雙抗等試劑,確保其無菌且在有效期內(nèi)。

3. 實(shí)驗(yàn)動物或組織來源準(zhǔn)備:根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,選擇合適的動物并進(jìn)行相應(yīng)的麻醉或處死,獲取所需組織;或從已有的組織樣本庫中獲取組織。

取材與處理

1. 取材:在無菌條件下,迅速取出目標(biāo)組織,盡量減少對組織的損傷,并去除多余的脂肪、結(jié)締組織等非目的組織。

2. 清洗:將取出的組織用預(yù)冷的無菌PBS沖洗數(shù)次,以去除血液和雜質(zhì)。

3. 剪切:將組織剪成約1 - 2mm3的小塊,以便后續(xù)消化。

細(xì)胞分離

1. 消化:將剪碎的組織塊放入含有適量消化酶的離心管中,在37℃恒溫?fù)u床或培養(yǎng)箱中消化一段時間。期間可輕輕搖晃離心管,使消化更均勻。

2. 終止消化:當(dāng)組織塊大部分被消化成單細(xì)胞懸液或小細(xì)胞團(tuán)時,加入含血清的培養(yǎng)基終止消化。

3. 過濾與離心:用細(xì)胞篩過濾細(xì)胞懸液,去除未消化的組織碎片,然后將濾液以適當(dāng)?shù)霓D(zhuǎn)速離心,收集細(xì)胞沉淀。

細(xì)胞觀察與檢測

1. 日常觀察:每天用倒置顯微鏡觀察細(xì)胞的形態(tài)、生長狀態(tài)、密度等,記錄細(xì)胞的變化情況,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞污染或異常,及時采取相應(yīng)措施。
2. 細(xì)胞計(jì)數(shù)與活力檢測:在需要時,可采用臺盼藍(lán)染色等方法對細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)和活力檢測,以了解細(xì)胞的生長情況和健康狀態(tài)。

大鼠支氣管成纖維細(xì)胞

大鼠支氣管成纖維細(xì)胞

一、取材與分離

1. 快速操作

- 組織取材后需立即處理,避免長時間暴露于室溫或非營養(yǎng)環(huán)境。

- 使用無菌 PBS 或生理鹽水沖洗組織,去除血液、雜質(zhì)。

2. 消化酶選擇

- 根據(jù)組織類型選擇消化酶,避免過度消化導(dǎo)致細(xì)胞損傷。

- 消化時間需嚴(yán)格控制(通常 10-30 分鐘),可通過顯微鏡觀察細(xì)胞解離狀態(tài)。

二、培養(yǎng)條件優(yōu)化

1. 培養(yǎng)基選擇

- 使用含血清或特定生長因子的培養(yǎng)基(如 DMEM、RPMI 1640 等),部分細(xì)胞需添加胰島素、EGF 等。

- 避免頻繁更換培養(yǎng)基品牌或批次,減少細(xì)胞適應(yīng)壓力。

2. 貼壁與傳代

- 原代細(xì)胞貼壁能力較弱,可能需要包被培養(yǎng)皿(如膠原蛋白、多聚賴氨酸)。

- 傳代時密度建議控制在 70%-80%,過度匯合會導(dǎo)致接觸抑制和分化。

三、污染控制

1. 無菌操作

- 全程在超凈臺操作,使用一次性耗材,避免交叉污染。

- 培養(yǎng)基中可添加雙抗,但長期使用可能影響細(xì)胞活性。

2. 支原體檢測

- 定期檢測支原體污染(如 PCR 法),污染后需及時丟棄細(xì)胞。

四、狀態(tài)監(jiān)控

1. 日常觀察

- 每天檢查細(xì)胞形態(tài)、密度及培養(yǎng)基顏色,及時更換培養(yǎng)基(通常每 2-3 天換液一次)。

- 異常形態(tài)(如細(xì)胞變圓、碎片增多)可能提示污染或營養(yǎng)不足。

2. 傳代與凍存

- 原代細(xì)胞分裂次數(shù)有限(一般 5-10 代),需及時凍存早期代次細(xì)胞。

- 凍存液建議使用 DMSO+血清(或?qū)S脙龃媾囵B(yǎng)基),梯度降溫后液氮保存。

大鼠支氣管成纖維細(xì)胞

小鼠雜交瘤細(xì)胞;EphA2

小鼠雜交瘤細(xì)胞;ELK1

小鼠雜交瘤細(xì)胞;EphA1

30nmPEG修飾金納米顆粒

小鼠雜交瘤細(xì)胞;EphA3

動態(tài)濁度法鱟試劑  

小鼠雜交瘤細(xì)胞;EphB3

快速檢測鱟試劑盒

小鼠雜交瘤細(xì)胞;EphB4

動態(tài)顯色法鱟試劑盒

小鼠雜交瘤細(xì)胞;EphB2

堿性磷酶染色試劑盒(改良Gomori鈣鈷法)

小鼠雜交瘤細(xì)胞;ER

剛果紅染色液(1%)

家豬皮膚細(xì)胞;SSC-S1

天青石藍(lán)B染色液

小鼠雜交瘤細(xì)胞;ERK2

80nmPEG修飾金納米顆粒

小鼠雜交瘤細(xì)胞;ERK5

鞣溶液(5%)

小鼠雜交瘤細(xì)胞;FES

醛品紅染色液

小鼠雜交瘤細(xì)胞;FGF2

磷鉬水溶液(1%)

小鼠雜交瘤細(xì)胞;FBLN2

大鼠支氣管成纖維細(xì)胞肌纖維染色試劑盒(Puchtler法)

小鼠雜交瘤細(xì)胞;FGFR3

單胺氧化酶(MAO)染色試劑盒(NBT法)

DREADD agonist 21

網(wǎng)狀纖維染色試劑盒(改良Gordon-Sweets法)






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