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Cates-B(人睪丸淋巴胚胎性癌細(xì)胞)具體操作
取出凍存管: 根據(jù)細(xì)胞凍存記錄按標(biāo)簽找到所需細(xì)胞的編號。
從液氮罐中取出細(xì)胞盒,取出所需的細(xì)胞,同時(shí)核對管外的編號。
初學(xué)者易犯錯(cuò)誤:水浴鍋未預(yù)熱或者未預(yù)熱到37℃。
水浴鍋內(nèi)凍存管太多,導(dǎo)致傳熱不佳,使融化時(shí)間延長。
離心前忘記平衡,導(dǎo)致離心機(jī)損壞和細(xì)胞丟失。
一次復(fù)蘇細(xì)胞過多,忘記更換吸頭和吸管,導(dǎo)致細(xì)胞交叉污染。
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:將水浴鍋預(yù)熱至37℃
Cates-B(人睪丸淋巴胚胎性癌細(xì)胞)用75%酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺臺面。
在超凈工作臺中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶 等。
迅速解凍:
迅速將凍存管投入到已經(jīng)預(yù)熱的水浴鍋中迅速解凍,并要不斷的搖動,使管中的液體迅速融化。
.約-2min后
凍存管內(nèi)液體*溶解,取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁,再拿入超凈臺內(nèi)。
平衡離心:用架盤天平平衡后,放入離心機(jī)中3000r/min 離心3min
制備細(xì)胞懸液:吸棄上清液。
向離心管內(nèi)加入0ml培養(yǎng)液,吹打制成細(xì)胞懸液。
活化與細(xì)胞復(fù)蘇 收到細(xì)胞株包裹時(shí), 請檢查細(xì)胞株冷凍管是否有解凍情形, 若有請立即通知。細(xì)胞株請盡速開始培養(yǎng), 或立即冷凍保存(置于–70 °C, 隔夜后, 移到liq N2)。
細(xì)胞復(fù)蘇的原則-快速融化:必須將凍存在-96℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃,使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶,對細(xì)胞造成損害。
細(xì)胞計(jì)數(shù):細(xì)胞濃度以5×05/ml為宜。
培養(yǎng)細(xì)胞將復(fù)合細(xì)胞計(jì)數(shù)要求的細(xì)胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶內(nèi),將培養(yǎng)瓶放入37℃和5%CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)2-4小時(shí)(或者24-48小時(shí))后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng),換液的時(shí)間由細(xì)胞情況而定。
公司其他銷量大產(chǎn)品信息:酶類
000 (牛)/α-/α-/凝胰朊酶/凝/Chymotrypsin(bovine)/ α-Chymotrypsin(bovine) USP級,500USP u/mg,有害品 克 CAS:9004-07-3 CAS:9004-07-3(牛) (牛) α-Chymotrypsin(bovine)
0克
0003 α-(枯草桿菌)/中溫/液化型/液化酶/α-,4糊精酶/細(xì)菌性/α-淀粉酵素/糊精化酶 BR,4000u/g,有害品 50克 9000-90- 9000-90-α-(枯草桿菌)
生物技術(shù)級,50u/mg,有害品 克
0004 高峰α-/高峰/高溫/耐熱α-/淀粉糖化酶/他卡糖化素/α-Amylase from Aspergillus oryzae BR,4000u/g,有害品 50克 900-9-8 900-9-8高峰α- 高峰α- α-Amylase from Aspergillus oryzae
生物技術(shù)級,30u/mg,有害品 0克
0005 β-/,4-α-D-葡聚糖麥芽水解酶/糖原酶/糖化/β-Amylase 生物技術(shù)級,7u/mg 日本TCK原裝 9000-9-3 9000-9-3β- β- β-Amylase
BR,50u/mg
0006 果膠酶/粘膠質(zhì)酶/果膠甲脂酶/聚半乳糖醛suan"酶/Pectinase BR,500u/mg 903-75- 903-75-果膠酶 果膠酶 Pectinase
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3004918891發(fā)送信件產(chǎn)品分類
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