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人胃癌組織成纖維細(xì)胞

【概要描述】人胃癌組織成纖維細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:HuNS1多發(fā)性骨髓瘤人結(jié)腸平滑肌細(xì)胞人結(jié)腸成纖維細(xì)胞人膽囊上皮細(xì)胞人肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞人肝外膽管上皮細(xì)胞人肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞人肝星狀細(xì)胞人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞人直腸成纖維細(xì)胞

型號(hào): 點(diǎn)擊量:650 廠商性質(zhì):代理商 更新日期:2025-03-19
產(chǎn)品詳情

本公司所有產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn),不做其他科學(xué)實(shí)驗(yàn)外的使用!
人胃癌組織成纖維細(xì)胞

產(chǎn)品名稱

人胃癌組織成纖維細(xì)胞

組織來(lái)源

胃癌組織

規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

包裝

T25培養(yǎng)瓶

貨號(hào)

GOY-01X1293

細(xì)胞形態(tài)

成纖維細(xì)胞樣


人胃癌組織成纖維細(xì)胞

人胃癌組織源成纖維分離自患有胃癌病人的胃癌組織;胃癌(gastric carcinoma)是起源于胃黏膜上皮的惡性腫瘤,在我國(guó)各種惡性腫瘤中發(fā)病率居,胃癌可發(fā)生于胃的任何部位,其中半數(shù)以上發(fā)生于胃竇部,胃大彎、胃小彎及前后壁均可受累,絕大多數(shù)胃癌屬于腺癌。在胃癌侵襲和轉(zhuǎn)移的過(guò)程中,涉及諸多復(fù)雜的過(guò)程,如細(xì)胞外基質(zhì)的硬化和降解、新生血管的形成等,而這些過(guò)程會(huì)直接或間接的引起腫瘤微環(huán)境(Tumor mircoenvironment)的改變。腫瘤微環(huán)境即腫瘤細(xì)胞生存的外部環(huán)境,由不同種類的非腫瘤性的細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)(Extracellular matrix,ECM)構(gòu)成,包括纖維細(xì)胞,免疫細(xì)胞,內(nèi)皮細(xì)胞,間充質(zhì)干細(xì)胞等,腫瘤細(xì)胞通過(guò)調(diào)控這些間質(zhì)細(xì)胞,創(chuàng)造出有利于自身侵襲轉(zhuǎn)移的條件,從而使得腫瘤得到進(jìn)展。越來(lái)越多的證據(jù)表明,腫瘤微環(huán)境的改變?cè)谀[瘤進(jìn)展中扮演著重要的角色。在腫瘤微環(huán)境中,研究最多也是最主要的間質(zhì)細(xì)胞是腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞(cancer-associated fibroblasts, CAFs)。CAFs 主要由腫瘤周邊的正常成纖維細(xì)胞和成纖維細(xì)胞樣細(xì)胞演化而來(lái)。胃癌組織源成纖維細(xì)胞多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。剛分離的胃癌組織源成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開(kāi)始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁wan全,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長(zhǎng),不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長(zhǎng)迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長(zhǎng),平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
方法簡(jiǎn)介:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人胃癌組織成纖維采用混合膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人胃癌組織成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

 


人胃癌組織成纖維細(xì)胞

人胃癌組織成纖維細(xì)胞

培養(yǎng)基 FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)

消化液 0.25%yi蛋白酶

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

人胃癌組織成纖維細(xì)胞

準(zhǔn)備工作

1. 實(shí)驗(yàn)器材準(zhǔn)備:準(zhǔn)備無(wú)菌的培養(yǎng)皿、培養(yǎng)瓶、移液管、離心管、手術(shù)器械等,并進(jìn)行高壓滅菌或其他合適的消毒處理。

2. 試劑準(zhǔn)備:配制或購(gòu)買(mǎi)合適的培養(yǎng)基、消化酶(如、膠原酶等)、胎牛血清、雙抗等試劑,確保其無(wú)菌且在有效期內(nèi)。

3. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物或組織來(lái)源準(zhǔn)備:根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,選擇合適的動(dòng)物并進(jìn)行相應(yīng)的麻醉或處死,獲取所需組織;或從已有的組織樣本庫(kù)中獲取組織。

取材與處理

1. 取材:在無(wú)菌條件下,迅速取出目標(biāo)組織,盡量減少對(duì)組織的損傷,并去除多余的脂肪、結(jié)締組織等非目的組織。

2. 清洗:將取出的組織用預(yù)冷的無(wú)菌PBS沖洗數(shù)次,以去除血液和雜質(zhì)。

3. 剪切:將組織剪成約1 - 2mm3的小塊,以便后續(xù)消化。

細(xì)胞分離

1. 消化:將剪碎的組織塊放入含有適量消化酶的離心管中,在37℃恒溫?fù)u床或培養(yǎng)箱中消化一段時(shí)間。期間可輕輕搖晃離心管,使消化更均勻。

2. 終止消化:當(dāng)組織塊大部分被消化成單細(xì)胞懸液或小細(xì)胞團(tuán)時(shí),加入含血清的培養(yǎng)基終止消化。

3. 過(guò)濾與離心:用細(xì)胞篩過(guò)濾細(xì)胞懸液,去除未消化的組織碎片,然后將濾液以適當(dāng)?shù)霓D(zhuǎn)速離心,收集細(xì)胞沉淀。

細(xì)胞觀察與檢測(cè)

1. 日常觀察:每天用倒置顯微鏡觀察細(xì)胞的形態(tài)、生長(zhǎng)狀態(tài)、密度等,記錄細(xì)胞的變化情況,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞污染或異常,及時(shí)采取相應(yīng)措施。
2. 細(xì)胞計(jì)數(shù)與活力檢測(cè):在需要時(shí),可采用臺(tái)盼藍(lán)染色等方法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)和活力檢測(cè),以了解細(xì)胞的生長(zhǎng)情況和健康狀態(tài)。

人胃癌組織成纖維細(xì)胞

人胃癌組織成纖維細(xì)胞

小鼠結(jié)腸成纖維細(xì)胞

小鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞

小鼠結(jié)腸神經(jīng)元細(xì)胞

數(shù)顯款旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀RE100-S 1700cm2套裝

小鼠結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞

數(shù)顯款旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀RE100-S 1200cm2帶歐標(biāo)玻璃件套裝(不帶加熱鍋)

小鼠結(jié)膜成纖維細(xì)胞

EcoStir 經(jīng)濟(jì)款磁力攪拌器(方盤(pán))

小鼠結(jié)膜囊成纖維細(xì)胞

數(shù)顯款旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀RE100-S 1700cm2帶玻璃件套裝(不帶加熱鍋)

小鼠結(jié)膜上皮細(xì)胞

微孔板離心機(jī)

小鼠晶狀體上皮細(xì)胞

臺(tái)式高速微量小型離心機(jī),CE標(biāo)(含A12-2P 塑料轉(zhuǎn)子套裝)

人臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞

(醫(yī)療)DLAB 臺(tái)式高速微量離心機(jī),(含AS24-2轉(zhuǎn)子套裝)

小鼠頸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞

旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀RE100-S 1200cm2套裝

小鼠頸動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞

HP550-S數(shù)顯7寸加熱板套裝

小鼠頸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞

dPette+電動(dòng)移液器 5-50μl

小鼠口腔黏膜上皮細(xì)胞

HP380-Pro LCD 數(shù)控6寸方盤(pán)加熱板

小鼠淋巴管成纖維細(xì)胞

人胃癌組織成纖維細(xì)胞HP380-Pro數(shù)控6寸加熱板套裝

小鼠淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞

HP550-S LED數(shù)顯7寸加熱板

安格洛甙C

dPette+電動(dòng)移液器 0.5-10μl


人胃癌組織成纖維細(xì)胞

一、取材與分離

1. 快速操作

- 組織取材后需立即處理,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于室溫或非營(yíng)養(yǎng)環(huán)境。

- 使用無(wú)菌 PBS 或生理鹽水沖洗組織,去除血液、雜質(zhì)。

2. 消化酶選擇

- 根據(jù)組織類型選擇消化酶,避免過(guò)度消化導(dǎo)致細(xì)胞損傷。

- 消化時(shí)間需嚴(yán)格控制(通常 10-30 分鐘),可通過(guò)顯微鏡觀察細(xì)胞解離狀態(tài)。

二、培養(yǎng)條件優(yōu)化

1. 培養(yǎng)基選擇

- 使用含血清或特定生長(zhǎng)因子的培養(yǎng)基(如 DMEM、RPMI 1640 等),部分細(xì)胞需添加胰島素、EGF 等。

- 避免頻繁更換培養(yǎng)基品牌或批次,減少細(xì)胞適應(yīng)壓力。

2. 貼壁與傳代

- 原代細(xì)胞貼壁能力較弱,可能需要包被培養(yǎng)皿(如膠原蛋白、多聚賴氨酸)。

- 傳代時(shí)密度建議控制在 70%-80%,過(guò)度匯合會(huì)導(dǎo)致接觸抑制和分化。

三、污染控制

1. 無(wú)菌操作

- 全程在超凈臺(tái)操作,使用一次性耗材,避免交叉污染。

- 培養(yǎng)基中可添加雙抗,但長(zhǎng)期使用可能影響細(xì)胞活性。

2. 支原體檢測(cè)

- 定期檢測(cè)支原體污染(如 PCR 法),污染后需及時(shí)丟棄細(xì)胞。

四、狀態(tài)監(jiān)控

1. 日常觀察

- 每天檢查細(xì)胞形態(tài)、密度及培養(yǎng)基顏色,及時(shí)更換培養(yǎng)基(通常每 2-3 天換液一次)。

- 異常形態(tài)(如細(xì)胞變圓、碎片增多)可能提示污染或營(yíng)養(yǎng)不足。

2. 傳代與凍存

- 原代細(xì)胞分裂次數(shù)有限(一般 5-10 代),需及時(shí)凍存早期代次細(xì)胞。

- 凍存液建議使用 DMSO+血清(或?qū)S脙龃媾囵B(yǎng)基),梯度降溫后液氮保存。




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