兔抗羊IgG-RBITC抗體*,兔抗羊IgG-RBITC抗體用于免疫組化實驗，WB實驗，相應的標記抗體有HRP標記抗體，FITC標記，BIO等。

【貯存條件】： 貯存于-20℃. 本品應在低溫下保存，長時間在暴露在空氣中，含量會有所降低。

規格：0.5ml

材料和方法

　　. 材料 人成骨肉瘤MG63細胞為本實驗室保存。重組質粒MycSSHL(WT)、MycSSHL(S937A S978A/2SA)以及recombinant cofilinHis6由王巖教授惠贈。脂質體 2000( Invitrogen公司)。高糖DMEM培養基(美國Gibco 公司)，胎牛血清(Hyclone公司)，和EDTA(Sigma 公司)。A2387，KN93，CaM，重組Ca2+/CaMK Ⅱ(Rat Brain，Calbiochem)。抗體：Myc (9E0;Roche)，HA (3F0;Roche)，Pcofilin，Cofilin(Santa Cruz)， CaMKⅡδδ4 (Trans Genic Inc.)，PCaMKⅡα/β(Thr286/287;Upstate)。免疫共沉淀(Protein Gagarose)試劑盒(邁晨科技有限公司)。

　　.2 蛋白印跡實驗 MG63細胞鋪于35 mmol/L培養皿中，待細胞密度達到60%～70%時，轉染MycSSHL，48 h后換無血清培養基培養3 h，分別加入濃度為0.5，，2.5，5 μmol/L的A2387孵育0 min后裂解細胞，離心取上清加入凝膠加樣緩沖液,沸水浴上加熱5 min，上樣、電泳、轉膜、雜交〔一抗分別為Pcofilin、Cofilin、PCaMK Ⅱ δ及CaMK Ⅱ δ(4)〕、ECL顯色。

　　.3 體外激酶測定 MycSSHL(WT)及其突變體MycSSHL(2 SA)分別轉染至MG63細胞，48 h后采用免疫共沉淀(Protein Gagarose)試劑盒的方法及抗cmyc抗體，對照組為抗IgG抗體。回收MycSSHL，加入0.6 μg/ml重組活性CaMKⅡ(單獨或同時加入抑制劑KN93)以及00 μmol/L ATP、5 μCi〔γ32P〕ATP 于 20 μl 激酶反應緩沖液中，30℃反應40 min。反應產物進行SDSPAGE電泳、轉膜，應用放射自顯影技術檢測32P 標記的SSHL水平。

　　.4 體外SSHL磷酸酶活性測定實驗 MycSSHL(WT)或MycSSHL (2 SA)轉染至MG63細胞，48 h后，采用免疫共沉淀(Protein Gagarose)試劑盒的方法及抗cmyc抗體，對照組為抗IgG抗體。回收MycSSHL，加入0.6 μg/ml CaMKⅡ(單獨或同時加入抑制劑KN93)，20 μg/ml CaM，以及 6.3 μg/ml cofilinHis6 于 20 μl 反應緩沖液(50 mol/L HEPES，pH 7.4，0. mol/L CaCl2，0.5 mol/L EDTA，3 mol/L MgCl2，00 mmol/L NaCl， mol/L dithiothreitol，0.5 mg/ml BSA， μg/ml leupeptin),中30℃反應2 h。反應產物進行SDSPAGE電泳、轉膜、雜交(一抗分別為Pcofilin，Cofilin， cmyc 抗體)、ECL顯色。

本公司更多產品優惠:

大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5bTRACP-5b抗體    329    鼠抗人Cdk/p34cdc2單克隆抗體    Cdk/p34cdc2      p53凋亡刺激蛋白抗體

大鼠抗心磷脂抗體IgAACA-IgA抗體    337    兔抗人C-erbB-2克隆抗體    C-erbB-2  Oncoprotein       磷酸化活化復制因子2抗體
大鼠抗心磷脂抗體IgGACA-IgG抗體    338    鼠抗人C-erbB-2單克隆抗體    C-erbB-2/neu Oncoprotein      活化轉錄因子3抗體
大鼠抗心磷脂抗體IgMACA-IgM抗體    339    鼠抗人層粘連蛋白受體多克隆抗體    Laminin Receptor      自噬相關蛋白7抗體
大鼠抗血小板抗體IgG/M/APA-IgG/M/A抗體    340    鼠抗人白細胞共同抗原單克隆抗體    Leukocyte Common Antigen (LCA)     活化轉錄因子4抗體
大鼠抗AT抗體    34    鼠抗人白細胞特異性單克隆抗體    Leukocyte Specific Protein       毛細血管擴張性共濟失調癥突變蛋白抗體
大鼠抗增殖細胞核抗原抗體PCNA抗體    342    鼠抗人單克隆抗體    Linker for Activation of T cells        鈣離子ATP酶通道蛋白抗體
大鼠抗中性粒/中心體抗體ACA抗體    343    鼠抗人腔上皮抗原單克隆抗體    Luminal Epithelial Ag        活化轉錄因子6抗體