溫敏突變株在發酵工業中的應用
①溫敏突變株在發酵的應用 發酵中增加產量的關鍵,決定于細胞膜的滲透性。選育細胞膜結構或功能缺損的溫敏突變株,可以通過調節溫度來控制細胞瞠的滲透性,促使大量外泄。
②溫敏突變株在發酵中的應用 以cl化合物為*碳源的微生物,合成細胞組分是通過途徑來實現的??梢钥闯?,要提高產量關鍵在于阻斷降解途徑。在過程中曾采用一些抑制劑,提高了的轉化率,即當產生菌生長到一定階段,加入8一羥基喹啉、2.2一聯吡啶、CO 2+或Ni 2+等,以抑制殘余的降解活力。但這種外加藥物的方法用于工業并不是理想方法。選育降解酶溫敏突變株,在許可溫度下,產生菌具有正常的降解活力,能利用甲醇生長繁殖。當溫度上升到非許可范圍時,產生菌失去降解作用,因而能大量分泌。
(3)溫敏突變株在微生物單細胞蛋白中的應用 單細胞蛋白的菌種,除含有高蛋白質特性外,還要具有兩個特點:①生長迅毫.底物利用率高;②菌體細胞壁易破碎、容易自溶,且細胞易于沉降,便于分離純化.有益于動物消化利用。
對于單細胞蛋白的菌種,現已篩選到一些具有特色的溫度敏感突變株。例如DNA復制缺損的TS突變株,在許可溫度下培養時菌體形態和生長都正常,但當溫度上升到非許可溫度培養時,細胞形態開始發生變化。細胞伸長,從母細胞上長出的芽也變長,且不脫落.繼續培養,細胞和芽凝聚成叢狀,易于凝集沉降。又如易于自溶的TS突變株,在許可溫度下培養時,生長正常。當細胞生長繁殖達到zui大量時,調節溫度到非許可狀態,繼續培養.菌體細胞發生自溶,此時釋放到細胞外的蛋白質含量占細胞總蛋白質的30%,而親株僅2%。另外,篩選蛋氨酸含量高的TS突變株,能提高單細胞蛋白的營養價值。
TS突變株用于工業發酵的前景十分誘人。例如篩選三羧酸循環缺陷溫敏突變株,透過溫度控制阻斷三羧酸循環,提高檸檬酸等有機酸產量。
篩選合成代謝酶缺失的溫敏突變株對發酵工業特別有利。這種溫敏突變株在許可溫度下培養時酶活力正常.不需要添加生長因子。當菌體生長到一定階段,將溫度升高到非許可條件下,此時合成代謝酶活力下降或*消失,不能合成終產物,使反饋調節被解除,因此中間產物能不斷地被合成和積累。細胞